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移液器操作指南及常见错误分(fēn)析
来源:室内环境检测部(网络转载) 时间:2019-11-26 浏览量:6878

移液枪是实验操作上不可(kě)缺少的工具,对于顶尖高手而言,重要的就是实验的误差最小(xiǎo),重复再现性好,那就要注意正确移液枪使用(yòng),避免因小(xiǎo)失大。

移液六部曲


1、装吸头

移液器套柄用(yòng)力下压,需要时小(xiǎo)幅度旋转即可(kě)。

错误操作:

用(yòng)力敲击吸头。此方法会带来吸头损坏甚至移液器套柄磨损,从而影响其密封性。

2、量程设定

操作之前请先选择正确的移液器,移液器可(kě)在10~100%量程范围内操作,但在10%量程处操作对于移液技巧要求高,故推荐在35~100%量程范围内操作。

量程调节:

当由小(xiǎo)量程调节至大量程时,朝所需量程方向连贯旋转,旋转到达超过所需量程1/3圈处再回调至所需量程。当由大量程调节至小(xiǎo)量程时,直接连贯旋转至所需量程。

3、润洗

粘稠液體(tǐ)可(kě)以通过吸头预润湿的方式来达到精确移液,先吸入样液,打出, 吸头内壁会吸附一层液體(tǐ),使表面吸附达到饱和,然后再吸入样液,最后打 出液體(tǐ)的體(tǐ)积会很(hěn)精确。

用(yòng)同一样品重复吸液排液二至三次,润洗為(wèi)以后每次吸液提供相同的接触面,保证操作的一致性。

对常温样品,吸头润洗有(yǒu)助于提高准确性;但是对于高温或低温样品,吸头润洗反而降低操作准确性,请使用(yòng)者特别注意。

4、吸头浸入角度

吸液时尽量保持垂直状态,倾斜角度不能(néng)超过20°

5、吸头浸入深度


6、吸头浸入时间

吸液后在液面中保持一秒(miǎo)钟再将吸头平缓移开,这对于大容量移液器或者吸取粘性样品尤為(wèi)重要。

7、吸液速度

匀速连贯移液,控制好移液速度,太快会造成喷液,液體(tǐ)或者气雾冲入移液器内部,污染活塞等部件。

8、排液及吹液

先将活塞按至第一档排液,略作停顿后按至第二档进行吹液。

排液四种方式:

9、手温

移液器不宜長(cháng)时间握在手里,不用(yòng)时最好将其挂在支架上或者挂在手上晾一下。


移液枪使用(yòng)诀窍

1、影响移液枪精度因素

(1)温度:

室温低时,手温较高,使得空气膨胀,吸入冷溶液时往往发生误差;

(2)气密性:

tip和枪體(tǐ)的结合部,以及枪内柱體(tǐ)之间的長(cháng)期磨损,造成误差;

(3)吸速:

容易造成tip内气泡产生,而且会污染枪头;

(4)试剂的挥发:

吸挥发性高的试剂时,蒸汽进入枪头,内压增高,结果在压出液體(tǐ)时,压力变大,而产生误差;

解决办法:

反复抽吸4~5次就可(kě)改善。

2、使用(yòng)注意事项

(1)吸取液體(tǐ)时一定要缓慢平稳地松开拇指,绝不允许突然松开,以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气;

(2)為(wèi)获得较高的精度,吸头需预先吸取一次样品溶液,然后再正式移液,因為(wèi),吸取血清蛋白质溶液或有(yǒu)机溶剂时,吸头内壁会残留一层“液膜”,造成排液量偏小(xiǎo)而产生误差;

(3)浓度和粘度大的液體(tǐ),会产生误差,為(wèi)消除其误差的补偿量,可(kě)由试验确定,补偿量可(kě)用(yòng)调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定;

(4)可(kě)用(yòng)分(fēn)析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正取液器,1mL蒸馏水20℃时重0.9982g;

(5)移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可(kě)取的,長(cháng)期操作会使内部零件松散而损坏移液器;

(6)移液器未装吸头时,切莫移液;

(7)在设置量程时,请注意,旋转到所需量程,数字清楚显示在窗中,所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程,否则,会卡住机械装置,损坏移液器。

(8)移液器严禁吸取有(yǒu)强挥发性、强腐蚀性的液體(tǐ)(如,浓酸、浓碱、有(yǒu)机物(wù)等)。

(9)严禁使用(yòng)移液器吹打混匀液體(tǐ)。

(10)不要用(yòng)大量程的移液器移取小(xiǎo)體(tǐ)积的液體(tǐ),以免影响准确度。同时,如果需要移取量程范围以外较大量的液體(tǐ),请使用(yòng)移液管进行操作。

移液器的自行检测

移液器在使用(yòng)过程中,如果怀疑其精确度,可(kě)根据以下提示自行检测:

怀疑一:移液器是否有(yǒu)漏气?

1、自行检测:

目视法检测:将吸取液體(tǐ)后的移液器垂直静置15秒(miǎo),观察是否有(yǒu)液滴缓慢

的流出。若有(yǒu)流出,说明有(yǒu)漏气现象。

压力泵检测:使用(yòng)专用(yòng)的压力泵,检测压力情况,判断是否漏气。

2、 可(kě)能(néng)的原因:

(1)吸头是否匹配?—— 使用(yòng)原装匹配的吸头

(2)装配吸头时有(yǒu)无上紧?

(3)移液器内部气密性不好?

怀疑二:液體(tǐ)、移液器、吸头以及环境的温度差异是否会影响移液器的准确度?

移取液體(tǐ)的温度与吸头和移液器的温度不一致的情况下,液體(tǐ)温度高于吸头的,移取的液體(tǐ)體(tǐ)积会偏大,液體(tǐ)温度低于吸头的,移取的液體(tǐ)體(tǐ)积会偏小(xiǎo)。

怀疑三:液體(tǐ)样品的密度和水是否有(yǒu)非常明显的區(qū)别?

大部分(fēn)移液器出厂前的校准是用(yòng)水作為(wèi)标准液进行测试的,如果所操作的液體(tǐ)与水的比重有(yǒu)很(hěn)大差异,所给出的不精确度和不准确度就不能(néng)满足,从而产生误差。

怀疑四:吸液速度太快,是否会导致移液體(tǐ)积不准确?

吸液速度太快会产生反冲和气泡,导致移液體(tǐ)积不准确。

ps:移液器長(cháng)时间不用(yòng)时建议将刻度调至最大量程,让弹簧恢复原形,延長(cháng)移液器的使用(yòng)寿命。

移液器错误操作及处理(lǐ)方法

做為(wèi)液體(tǐ)操作中最常用(yòng)的手动可(kě)调精密移液器,在使用(yòng)过程中有(yǒu)些错误的操作会给操作本身带来误差,有(yǒu)些会造成机器的损坏等,在这里简单总结如下:

错误:装配吸头时用(yòng)移液器反复撞击吸头,以上紧;

正确:插入吸头,左右轻转旋转上紧吸头;

分(fēn)析:撞击会造成移液器内部齿轮组合的松动,長(cháng)期操作会对移液器的精确性造成影响;

错误:吸头与移液器不匹配,影响气密性;正确选用(yòng)与移液器匹配、有(yǒu)质量保证的吸头;

分(fēn)析:吸头的不匹配,主要表现為(wèi)对气密性的影响。会直接影响移液器的精确性,通常会移液操作会小(xiǎo)于设定量;

错误:吸液时,移液器倾斜吸液;

正确:垂直吸液;

分(fēn)析:倾斜的状态会造成气压面的改变。会对移液精度造成影响;

错误:吸头内含有(yǒu)未打出的液體(tǐ)时,移液器平置于桌面;
正确:将移液器垂直挂在移液器支架上;

分(fēn)析:吸头内含有(yǒu)未打出液體(tǐ),移液器平放之后液體(tǐ)有(yǒu)可(kě)能(néng)会流到移液器體(tǐ)内部,这会对移液器内部组件造成影响,严重的回造成损坏,较差污染等情况的发生;

错误:用(yòng)大量程的移液器移取小(xiǎo)體(tǐ)积的液體(tǐ);

正确:移液體(tǐ)积需保证在移液器所提供的量程范围之内才符合不准确度和不精确度的要求;

分(fēn)析:因為(wèi)空气垫的存在,是造成移液器不准确度的主要原因。移液器的选择应该是最大量程,最接近目的液體(tǐ)转移量的选型原则;

错误:吸取具有(yǒu)强挥发性的液體(tǐ);

正确:不建议用(yòng)普通移液器做强挥发型液體(tǐ)转移;

分(fēn)析:如果一定要移取强挥发性的液體(tǐ),应该在移液结束后立刻拆开移液器,让蒸汽挥发,同时,建议使用(yòng)外置活塞式移液器;

错误:吸液速度和放液速度过快;

正确:慢吸慢放;

分(fēn)析:快吸对于1mL及以上量程的移液器,很(hěn)容易造成液體(tǐ)上冲,过快的放液会增加液體(tǐ)的残留量。